Engelhardia Roxburghiana bladekstrakt

Engelhardia Roxburghiana bladekstrakt dihydroquercetiner en dihydroflavonolforbindelse, der findes i mange planter. Ud over syntetisk dihydroquercetin på markedet er den vigtigste naturlige kilde lærk. Vores virksomhed har gennem forskning i bladene fra Astragalus membranaceus fundet ud af, at naturlige blade af Astragalus membranaceus også indeholder dihydroquercetin. Da lærkens ressourcer bliver mere og mere knappe, kan vores virksomheds opdagelse i høj grad reducere produktionsomkostningerne for dihydroquercetin og give de mest omkostningseffektive dihydroquercetin-produkter på markedet.

Som den største producent af dihydroquercetin i Kina har KINTAI to hovedprocesveje til fremstilling af dihydroquercetin: biosyntese og ekstraktion. Det dihydroquercetin, vi i øjeblikket producerer, er hovedsageligt udvundet af lærk, og noget udvindes fra ulvebærblade. Biosyntesen er ved at gå ind i pilotproduktionstesten, og når den er afsluttet, vil den give dig højkvalitets og billige dihydroquercetinprodukter. I det følgende introducerer vi hovedsageligt vores virksomheds nuværende udvindingsproces ved hjælp af ulvebærblade og syntesemetoden til biosyntese. Hvis du er interesseret i flere detaljer, så kontakt os venligst for mere professionelle svar.

COA for DHQ / Taxifolin

Væskekromatografianalyserapport

Vores forskerhold har for nylig lavet et vigtigt gennembrud i studiet af mikrobiel syntese af dihydroquercetin

Dihydroquercetin er en vigtig flavonoidforbindelse, der er meget udbredt i fødevarer, medicin og landbrug på grund af dets antioxidant, anti-inflammatoriske, anti-tumor og andre fysiologiske aktiviteter. Traditionelle planteudvindingsmetoder er dog begrænset af årstider, geografiske forhold og råvareforsyning, hvilket resulterer i høje produktionsomkostninger og ustabil produktion. Derfor bliver brugen af ​​mikroorganismer til den heterologe syntese af dihydroquercetin en attraktiv mulighed.

Mikrobiel syntese kan ikke kun undgå disse flaskehalse ved planteudvinding, men har også fordelene ved kort produktionscyklus, lave miljøkrav og nem kvalitetskontrol. Men på grund af begrænsninger af faktorer såsom metabolisk regulering, er det stadig en stor udfordring, hvordan man effektivt opnår syntesen af ​​dihydroquercetin i mikroorganismer. Gennem screening af nøgleenzymer, promotorteknologi, multikopi-integration og metabolisk omprogrammering har vi forbedret produktionen af ​​dihydroquercetin betydeligt og givet en effektiv måde for dets industrielle produktion.

Screening og optimering af nøgleenzymer F3'H og F3H

Synteseprocessen af ​​dihydroquercetin er afhængig af katalyse af to nøgleenzymer, F3'H og F3H. F3'H katalyserer hydroxyleringen af ​​(2S)-naringenin ved C-3'-positionen af ​​flavonoidskelettet for at generere (2S)-eriodictyol; F3H omdanner (2S)-naringenin til dihydrokaempferol. For at forbedre produktionen af ​​dihydroquercetin screenede vi tre F3'H og fem F3H fra forskellige planter. Efter eksperimenter blev det fundet, at SmF3'H og CsF3H havde de bedste katalytiske virkninger, idet de producerede (2S)-eriodictyol og dihydrokaempferol med udbytter på henholdsvis 254,1 mg/L og 173,4 mg/L. Derfor valgte vi disse to enzymer til efterfølgende synteseoptimering.

Optimering af promotorprojekter

For yderligere at forbedre ekspressionen af ​​SmF3'H og CsF3H introducerede vi promotorteknologi og optimerede ekspressionsniveauerne af disse nøgleenzymer. Ved at screene promotorer med forskellige styrker blev det fundet, at når SmF3'H og SmCPR blev udtrykt under kontrol af PGAL1- og PGAL10-promotorer, var titeren af ​​(2S)-eriodictyol den højeste og nåede 382,1 mg/L. På samme måde øgede vi produktionen af ​​dihydrokaempferol signifikant ved at regulere ekspressionen af ​​CsF3H og bruge promotorer af forskellige styrker såsom PTDH1, PGAL7 og PSSA1. Denne optimering viser, at ved at øge ekspressionsniveauet af nøgleenzymer kan synteseeffektiviteten af ​​målmetabolitter effektivt forbedres.

 Multi-copy integration forbedrer output

For yderligere at forbedre produktionen af ​​dihydroquercetin, adopterede vi gen multi-kopi integrationsteknologi. Ved at integrere genkopien af ​​dihydroquercetin-syntesevejen i Ty2-multikopistedet i Saccharomyces cerevisiae opnåede vi med succes en højproducerende stamme FQ26ty, hvis dihydroquercetin-titer nåede 71,4 mg/L. Kvantitativ genanalyse viste, at kopiantallet af SmF3H-, SmF3'H- og SmCPR-gener varierede fra 2,87 til 3,44, hvilket indikerer, at gen-multikopi-integration signifikant forbedrede produktionen af ​​dihydroquercetin. Derudover konstruerede vi stammen FQE-D-serien ved yderligere at integrere flere kopier af syntesevejgenerne og øgede med succes produktionen af ​​dihydroquercetin til 74,5 mg/L. Dette resultat beviser, at forøgelse af kopiantallet af centrale syntetiske pathway-gener er en effektiv strategi til at øge udbyttet af målprodukter.

Metabolisk omprogrammering og kulstofmetabolismeoptimering

Udover at optimere nøgleenzymer og genintegration har vi også metabolisk omprogrammeret kulstofmetabolismesystemet i Saccharomyces cerevisiae for yderligere at øge produktionen af ​​dihydroquercetin. Først introducerede vi PAL-pathway-relaterede gener, herunder AtPAL2, AtC4H, AtATR2 og ScCYB5, og den resulterende stamme FQ27 opnåede en dihydroquercetinproduktion på 87,8 mg/L. Efterfølgende øgede vi yderligere udbyttet til 103,9 mg/L ved at overudtrykke nøglegenerne ARO1/2/3 af shikimate-vejen og EcAROL-genet afledt af E. coli. Derudover introducerede vi også en heterolog phosphoketolase-vej til tæt at forbinde central carbonmetabolisme med syntesen af ​​erythrose-4-phosphat, og opnåede derefter stamme FQ29 med en dihydroquercetinproduktion på 107,5 mg/L.

Optimering af NADPH og alfa-ketoglutaratforsyning

F3'H skal forbruge NADPH under den katalytiske proces, mens F3H kræver -ketoglutarat som et co-substrat. For at øge udbuddet af disse to nøglestoffer overudtrykte vi derfor gener som TYR1 og ZWF1 for at øge udbuddet af NADPH. Eksperimenter viser, at co-ekspression af TYR1 og mutant BDH1* øger produktionen af ​​dihydroquercetin med 20,2% og når 175,8 mg/L. Derudover fremmede overekspression af ARO8 produktionen af ​​-ketoglutarat yderligere, hvilket resulterede i, at dihydroquercetinproduktion nåede 206 mg/L. Endelig opnåede vi ved at overudtrykke IDH1 en højudbyttestamme FQ38 med et udbytte på 235,1 mg/L.

Udforskning af industrialiseret produktion

Baseret på optimering i laboratorieskala udførte vi yderligere fed-batch fermenteringseksperimenter i en 5 L bioreaktor. Ved at tilsætte 5 g/L CaCO3 under fermenteringsprocessen øgede vi titeren af ​​dihydroquercetin til 873,1 mg/L inden for 114 timer, hvilket satte en ny produktionsrekord.

Sammenfattende har vi væsentligt forbedret den mikrobielle synteseeffektivitet af dihydroquercetin gennem systematisk metabolisk konstruktion og fermenteringsprocesoptimering. Denne forskning giver ikke kun et teknisk grundlag for den industrielle produktion af dihydroquercetin, men giver også en reference for den mikrobielle syntese af andre plantesekundære metabolitter.

Kosttilskud
Funktionelle fødevarer
Kosmetik

I en æra, hvor sundhed og velvære er i fokus, er DHQ førende i jagten på lang levetid, vitalitet og overordnet velvære. Som den største leverandør af lærkeekstrakter DHQ i Kina er Kintai din foretrukne partner for naturlige løsninger af høj kvalitet til at understøtte dine sundhed og velværemål.Hvis du ønsker at købe høj kvalitetEngelhardia Roxburghiana bladekstrakt, er du velkommen til at kontakte os påsales@kintaibio.comeller feedback på næste side.

Populære tags: engelhardia roxburghiana bladekstrakt, Kina engelhardia roxburghiana bladekstrakt producenter, leverandører, fabrik